Vprašanja za tesnjenje in kontaminacijo v krožnikih z več varovitami celične kulture

Nalaganje in ravnanje s krožniki za celično kulturo z več jami:

Plošča za celično kulturo sledi tudi načelu stroge asepse pri izvajanju celičnih operacij. Vse operacije morajo biti standardizirane in znanstvene in ne bodo povzročilo dodatnega vpliva na rast celic. Najpogostejša težava je, kako zagotoviti enakomernost celic po dodajanju vzorca in zmanjšati vpliv spreminjanja medija na stanje rasti celic.

vprašati:
Pokrovi 96 in 24-jamice kulturnih krožnikov ali petrijevih jedi so zelo ohlapni, kar je priročno za prezračevanje, a bodo zdrsnile tudi bakterije, plesen in druga onesnaževala?

odgovor:
Pokrov je zelo ohlapen, ki spada v pol odprto kulturo, namen tega pa je prezračevati (pravzaprav je, da se CO2 zunaj kulturne jedi v celoti izmenjuje s kulturo in ohrani pH vrednost kulture srednje).
Vse ima prednosti in slabosti, kar seveda poveča možnost onesnaženja. Poleg tega to povzroči, da tekočina v posodi izhlapi, kar je značilno za natančno odmerjanje zdravil. Zato sta potrebna naslednja dva ukrepa: a. Zrak v inkubatorju mora biti čist (redna ultravijolična svetloba, čiščenje alkohola, inkubator pa je treba odpreti in zapirati čim manj) b. Vlažnost v inkubatorju mora biti vedno 100% (umivalnik s sterilno destilirano vodo, nameščeno v inkubatorju).
Tako kot jed Petri, je tudi to posoda z naslonom na glavo in ne bo onesnažena. Predvsem zaradi negativnega tlaka pretoka zraka, ki ga ustvari "L" rob pokrova, so na prah pritrjeni mikroorganizmi, prah, ki ga prenaša pretok zraka, pa ne more preiti skozi rob pokrova, ki ustvarja negativen tlak. Učinek prezračevanja je le z difuzijo zraka in ne bo nastal noben zračni tok, zato bo le dihal in ne prodrl bakterij.

vprašati:
Z uporabo plošče s 24 vdolbinicami obstajajo operacije v nekaterih vrtinah (v ultra čisti klopi), v drugih vrtinah pa so gojene celice. Skrbi me, da bo to povzročilo kontaminacijo. Ne vem, na kaj bi bil pozoren?

odgovor:
Če je operacija standardizirana v ultra čisti klopi, bi morala biti v redu. Mislim, da lahko v celoti izkoristite pokrov kulturne plošče, poskusite izpostaviti samo luknje, ki jih je treba upravljati, in druge luknje pokrijete s pokrovi.
Pred uporabo razmislite o celovito in v celoti izkoristite vse luknje; Če morate uporabiti le nekaj lukenj, lahko uporabite samo eno stran, ostalo pa pokrijete s pokrovom. Navajen sem najprej uporabljati desno luknjo (priročno je dodati vzorce v desno roko).

Ko delujete, uporabite nekaj steklenih diapozitivov, da dvignete eno stran deske, ne odpirajte popolnoma, na splošno ni težav.
Neenakomerna porazdelitev in rešitve celic

vprašati:
Celice so inokulirane na kulturni plošči, celice pa se vedno zbirajo v perifernem delu, kako se z njo spoprijeti?

odgovor:
Lahko vprašam, kako se vaše celice mešajo? Ali pipettira ali trese kulturno ploščo? Če je slednje, in če ga stresemo v krogu, je zelo verjetno, da bodo celice zaradi centrifugalne sile vrgle v periferni del, kar ima za posledico manj celic na sredini. Več kot štiri tedne!
Tukaj je dober način: preden gojite semensko ploščo, dajte kulturno ploščo v inkubator za nekaj ur nasičenosti in jo nato vzemite ven. Pri zasaditvi celic mora biti sila lahka. Dodajanje počasi omogoča, da se celična suspenzija priteče v vrtine plošče in gojene celice v bistvu rastejo enakomerno. Ne pozabite, da se nikoli ne tresete s stresalnikom ali se bodo vaše celice združile, kot ste rekli.
Manjši kot je premer luknje kulturne plošče, bolj očiten je ta pojav. Ta pojav je neizogiben za 24 in 96 vdolbinice, ker se tekočina prilepi na steno, tako da kulturna raztopina v vodnjaku ne tvori tekočine, vendar je obrobje visoko, tako kot konkavno ogledalo. Toda pri uporabi teh dveh vrst odprtin ni mogoče dodati zadostne količine kulturne raztopine zaradi potrebe po dodatnem posegu, tako da se bodo celice skupaj z raztopino kulture pojavile "zbiranja robov". Odvisno od tega, katere kazalnike morate upoštevati. Če gre za MTT, bo imunohistokemija vplivala na rezultate zaradi plasti celic.
Pri prebavljanju celic bodite pozorni na enakomerno pipet, da se izognete celičnim gručam, in količina kulturne raztopine v vdolbinici bi morala biti zadostna. Na splošno dodajte dovolj kulturne rešitve pri inokuliranju in enkrat pri dodajanju intervencije spremenite rešitev. Količina kulturne rešitve, dodana intervencijski raztopini, je enaka količini kulturne raztopine v času inokulacije, v tem primeru se bo izboljšal pojav "robnega nabora", zato boste morda poskusili.

vprašati:
Kar sem storil, je bil eksperiment tvorbe plakov. Najbolje je, da celice razširimo v enakomerno plast. Večina lukenj je v redu, ko je virus inokuliran, nekatere pa niso enotne. V celični skupini obstajajo velike razlike. Rad bi vas vprašal, katero metodo uporabljate pri dodajanju celic?

odgovor:
Ključnega pomena je, da celice po prebavi pipetete v enocelično suspenzijo! Prepričajte se, da je število celic v vsaki vrtini dosledno pri delitvi plošče!
Seveda obstajajo tudi dejavniki obdelave. Zelo pomembna je tudi vzporednica med vodnjaki. Na primer, pri dodajanju zdravila zmešajte zdravilo po redčenju, da se zagotovi, da je koncentracija vsake vrtine dosledna!
Poleg tega je treba pri dodajanju celic in zdravil dodati preskusno skupino in kontrolno skupino, da se izognemo razliki v celični gostoti in koncentraciji zdravil, ki jo povzroča zaporedje dodajanja vzorcev!

vprašati:
Pihanje je že enotno, vendar so deske, 6 lukenj in 24 lukenj vedno nekoliko neenakomerne in malo koncentrirane na sredini. Poleg tega je očitno, da je štetje opravljeno, in po dnevu ali dveh je gostota vsake luknje drugačna, kar bo vplivalo na odkrivanje. Ali obstaja dober način?

odgovor:
Če uporabljate pasterjevo pipeto, vsakič ne sesajte preveč, ker se bodo celice v pipeti samodejno potopile, pogosto je število celic v prvih nekaj luknjah veliko, celična suspenzija Sledite poti v obliki črke S.
Če uporabljate pipeto, je treba nasvete obdelati in odstraniti, da se prepreči poškodovanje celic, tako da vsakič, ko se tekočina vzame, ustreza vodnjaku. Natančneje je dodati luknjo ena na ena s konico. Pa tudi pozorni na mešanje suspenzije.

Za nastavitev vzporedne skupine mora biti n dovolj velik (lahko jo izračunate).

Ne tresejte se po prevleki, saj bo tresenje povzročilo, da se celice združijo proti sredini. Najbolje je, da enkrat nastopite.

Porozna celična kultura Plate Yongyue Medical je nadzor nad kakovostjo vedno obravnaval kot življenje podjetja in nadaljeval nenehno izboljševanje konkurenčnosti podjetij. Podjetje se vedno drži podjetniškega duha spoštovanja zakonov in predpisov, ki je strogo s samodisciplino, prizanesljivo in si drzno prevzemanje odgovornosti kot standard pri delovanju, vzdrževanju in širjenju trga z odlično kakovostjo in odlično storitev ter izpolnjevanje tega Potrebe strank v največji meri. . WIN-WIN s strankami je naš razvojni cilj. Yongyue Medical! Vaš zaupanja vreden partner. Pripravljeni smo iskreno sodelovati z vami, da bi ustvarili boljšo prihodnost.